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    尊龙凯时 - 人生就是搏!工具试剂专栏(八):RT-PCR反转录及qPCR荧光定量系列
    发布时间:2025/5/14 9:21:35   点击次数:24次

     

    一、RT-PCR反转录

     

    反转录试剂盒I(含gDNA去除剂)

     

    产品介绍
    本试剂盒将去除基因组DNA(gDNA)酶和buffer进行了一管化处理,专为两步法 RT-PCR 第一步实验设计的超高灵敏度 RT-PCR 反应系统,可以从极低量的总 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一链 cDNA,并能够通读 GC 含量高、二级结构复杂的RNA 模板。通常通过柱纯化的RNA经常混入微量的gDNA,当检测目的基因中存在假基因或者无法横跨内含子设计引物时,混入的gDNA会被当成模板扩增,影响数据的准确性。本试剂盒增加了具有强力降解DNA的gDNA清除剂,通过该组分将混入RNA的gDNA降解,无需纯化即可对RNA进行反转录。另外,本产品将引物配比、反转录酶和RNase抑制剂优化成mix形式,精简了试剂盒组成,非常简便操作,而且对后续Realtime PCR反应体系影响也降到最低。


    产品特点
    1. 去除gDNA:只需2分钟,就可以实现去除基因组DNA污染。
    2. 方便快捷:mix配制,组分更少,操作更快;逆转录只需15min就可以完成。
    3. 超强对后续qPCR反应适用性:通过组分和Buffer优化,使带入到后续qPCR反应的逆转录反应液的影响降到最低。
    4. 高灵敏度:对极少量的RNA模板也可以进行良好的反转录反应。


    订购信息

    货号

    产品名称

    规格

    目录价格

    CN5101 

    反转录试剂盒I(含gDNA去除剂)

    100T(20ul体系)

    690

     

    反转录试剂盒II(含gDNA去除剂)


    产品介绍
    本产品是在反转录试剂盒I基础上采用了最新研制的耐高温(>50˚C),极速扩增的反转录酶,专为两步法 RT-PCR 第一步实验设计的超高灵敏度 RT-PCR 反应系统,可以从极低量(pg级到ug级)的总 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一链 cDNA,并能够通读 GC 含量高、二级结构复杂的 RNA 模板。通常通过柱纯化的RNA经常混入微量的gDNA,当检测目的基因中存在假基因或者无法横跨内含子设计引物时,混入的gDNA会被当成模板扩增,影响数据的准确性。本试剂盒增加了具有强力降解DNA的gDNA清除剂,通过该组分将混入RNA的gDNA降解,无需纯化即可对RNA进行反转录。另外,本产品将引物配比、反转录酶和RNase抑制剂优化成mix形式,精简了试剂盒组成,非常简便操作,而且对后续Realtime PCR反应体系影响也降到最低。


    产品特点
    1. 去除gDNA:只需2分钟,就可以实现去除基因组DNA污染。
    2. 方便快捷:mix配制,组分更少,操作更快;逆转录只需5min就可以完成。
    3. 超强对后续qPCR反应适用性:通过组分和Buffer优化,使带入到后续qPCR反应的逆转录反应液的影响降到最低。
    4. 高灵敏度:对极少量的RNA模板也可以进行良好的反转录反应。


    订购信息

    货号

    产品名称

    规格

    目录价格

    CN5201 

    反转录试剂盒II(含gDNA去除剂)

    100T(20ul体系)

    730

     

    二、qPCR荧光定量


    2X SYBRgreen Realtime PCR mix


    产品介绍
    本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行实时荧光定量PCR的专用2×浓度预混液。利用HotStart Taq DNA Polymerase高温加热前,anti-Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。Anti-Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的Taq Polymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I 荧光染料,特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,荧光可以在退火或延伸阶段测定。


    订购信息

    货号

    产品名称

    规格

    目录价格

    CN5301 

    2X SYBRgreen Realtime PCR mix

    5x1ml

    600

    CN5302

    (5x1ml)×10

    4800

     

    2X SYBR Premix EsTaq (with Tli RNaseH)


    产品介绍
    本品采用Sybrgreen嵌合荧光法进行荧光定量的专用试剂。制品中含有荧光定量反应的最适浓度Sybrgreen,是一种2×浓度的预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。制品中使用了antiTaq抗体的Hot Start法用DNA聚合酶,与荧光定量反应适合Buffer组合,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,可以进行高灵敏度的荧光定量扩增反应。另外,本品中添加了Tli RNaseH (耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。适合于快速荧光定量扩增反应,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。


    订购信息

    货号

    产品名称

    规格

    目录价格

    CN5401 

    2X SYBR Premix EsTaq (with Tli RNaseH)

    5ml(50ul反应×200次)

    600

    CN5402

    10ml(50ul反应×400次)

    1050

     

     

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